Johnny Test mostra as aventuras de um garoto corajoso de 11 anos, seu cachorro super-esperto e falador Dukey, e suas duas irmãs gêmeas, cientistas geniais, Susan e Mary, que usam Johnny como cobaia para suas experiências a fim de impressionar o vizinho Gil, que nunca as percebe mas é grande amigo de Johnny.

Johnny Test mostra as aventuras de um garoto corajoso de 11 anos, seu cachorro super-esperto e falador Dukey, e suas duas irmãs gêmeas, cientistas geniais, Susan e Mary, que usam Johnny como cobaia para suas experiências a fim de impressionar o vizinho Gil, que nunca as percebe mas é grande amigo de Johnny.